Для выявления антигенов холерного вибриона применяют агрегат гемаг-глютинационную пробу (АГГ). В основе её лежит использование для агрега­ции и фиксирования белков иммунной сыворотки на эритроцитах химиче­ского вещества из группы диазосоединений в виде препарата диазоль черно­го С. Эритроциты, сенсибилизированные агрегированными белками холер­ной 0-сыворотки, обладают высокой специфичностью и чувствительностью. С их помощью удается определить 0,01—0,005 мкг/мл «цельного» раство­ренного антигена, приготовленного по методу Буавена, и 4000—480 000 кле­ток холерного вибриона в микробных взвесях. Это позволяет считать АГГ од­ним из наиболее чувствительных иммунологических методов, который оп­равдал себя при обследовании людей. С помощью АГГ 0-антиген холерного вибриона обнаружен в 88,2% больных холерой и 78,3% вибриононосителей, причем в титрах 1 : 40 и выше 0-антиген определен у 76,1% больных и у 57,1% вибриононосителей. Серологически активный компонент эндотоксина обнаруживают в высоких титрах, чаще у тяжелых больных и в первые 3—5 дней болезни. В период реконвалесценции количество антигена в сыворот­ке крови снижается, но у 33% больных он сохраняется до 20—25 дней [По­кровский В. И., Малеев В. В., 1978]. Для определения холерогена, помимо биопроб, используют и иммунологические методы — РНГА и АГГ. В опытах с бесклеточными супернатантами культур холерных вибрионов порог чувст­вительности обоих методов составлял 0,01—0,005 мкг/мл.

Антительный ответ. Инфицирование человека холерным виб­рионом ведет к местному и системному ответу. Клинически выраженное за­болевание холерой сопровождается ростом уровня сывороточных антимик­робных (агглютинирующих и вибриоцидных) и токсиннейтрализующих ан­тител, как правило, уже к концу 1-й недели после появления симптомов бо­лезни. Агглютинины к холерному вибриону к 4-му дню заболевания выявля­ют у 35,7% больных, на 8-й день — практически у всех (98,6%). Уровень агглютининов достигает максимума на 2-й неделе заболевания (на 11—15-й день титры, равные 320 и выше, регистрируют у 71% больных), а затем резко падает. Титры вибриоцидных антител также увеличиваются к 8—10-му дню заболевания и после 3 нед (иногда несколько раньше) начинают снижаться, достигая первоначального уровня через 2—7 мес. У детей до 4 лет падение титра вибриоцидных антител происходит быстрее, чем в старшей возрастной группе (5—14 лет), достигая исходного уровня уже через 3 мес. Динамика титров токсиннейтрализующих антител имеет сходный характер — появ­ляясь в конце 1-й недели, они достигают максимума между 2-й и 3-й неделя­ми, а с 21-го дня снижаются.

Содержание сывороточных IgM и I gG на протяжении болезни сопоста­вимо с аналогичными показателями в контрольной группе, хотя есть данные об увеличении уровня IgM в острой стадии и снижении его в период рекон­валесценции. Некоторые исследователи не установили разницы в содержа­нии IgA при поступлении больных в стационар и в стадии реконвалесцен­ции; другие отмечают повышение его уровня у переболевших [Покров­ский В. И., Малеев В. В., 1978; Адамов А. К., 1981]. Сказанное не дает доста­точных оснований утверждать, что изменение уровня сывороточных иммуно-глобулинов при холере носит специфический характер.

Специфическая активность иммуноглобулинов различных классов зави­сит от формы и длительности инфекционного процесса при холере. Антитела в сыворотке крови переболевших относятся, преимущественно к IgM. У виб­риононосителей продуцируются, наоборот, высокоактивные IgG-антитела. Активность IgA-антител в сыворотке крови вибриононосителей незначитель­но выше по сравнению с больными. Чем тяжелее протекает заболевание, тем выше активность продуцируемых антител, относящихся к иммуноглобули-нам класса М, и ниже активность IgG-антител.